超高速離心機分離方法

2019-10-09 17:19:33 84

  超高速離心機分離方法

  一:差速離心:逐次增加離心力,每次可沉降樣品溶液中的一些組份。

  差速離心是一種最常用的方法。在這種方法中,離心管在開始時裝滿了均一的樣品溶液。通過在一定速度下一定時間的離心后,就可得到兩個部份:沉淀和上清液。

  通常在第一次離心時把大部分不需要的大粒子沉降去掉。這時所需的組份大部分仍留在上清液中。然后將收集到的上清液以更高速度離心,把所需的粒子沉積下來。離心的時間要選擇得當,使大部份不需要的更小的粒子仍留在上清液中。對于得到的沉淀和上清液可以進行進一步的離心,直到達到所需要的分離純度為止。

  差速離心的特點是操作簡單,但分離純度不高。

  二:密度梯度離心法:可以同時使樣品中幾個或全部組份分離,具有很好的分辨率。

  (1)速率區帶法:

  根據樣品中不同粒子所具有的不同的尺寸大小及沉降速度(S)。大致步驟如下:

  在離心管中裝入密度梯度溶液,溶液的密度從離心管頂部至底部逐漸增加(正梯度)。

  將所需分離的樣品小心地加至密度梯度溶液的頂部。樣品在梯度溶液表面形成一負梯度。

  由于不同大小的粒子在離心力作用下,在梯度中移動的速度不一樣,所以經過離心后會形成幾條分開的樣品區帶。

  注意:樣品粒子的密度必須大于梯度液注中任一點的密度。離心過程必須在區帶到達管子底部前停止。

  (2)等密度離心法:

  根據粒子的不同密度來分離。離心過程中,粒子會移至與它本身密度相同的地方形成區帶。

  密度樣度的選擇要使梯度的范圍包括所有待分離粒子的密度。樣品可以在密度梯度液粒上面或均勻分布在密度梯度中。經離心后,樣品粒子達到它們的平衡點。

  注意:平衡后粒子的分離完全由其密度決定,與時間無關,此時再改變離心轉速,只能改變區帶的相對位置。


標簽: 離心機
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